简单的 Puregene protocol使用改进的盐析沉淀法纯化 DNA, 无需混合或稀释溶液,并且将手动操作时间降至最低。
在存在 DNA 稳定剂的情况下,用阴离子去污剂裂解细胞。DNA 稳定剂限制了细胞内 DNase 以及在环境中的 DNase 的活性。然后通过用 RNA 消化酶处理去除 RNA。其他污染物,例如蛋白质,通过盐沉淀去除。最后,通过酒精沉淀回收基因组 DNA,并将其溶解在溶液(1 mM EDTA,10 mM Tris·Cl pH 7.5)中。纯化的 DNA 的 A 260 /A 280比率通常在 1.7 和 1.9 之间,大小可达 200 kb。DNA 可以在 2–8°C、–20°C 或 –80°C 下安全储存。
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